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    • 簡介:目的從中藥姜黃中提取分離、鑒定姜黃素類化合物,研究姜黃素單藥與臨床常用化療藥聯合用藥對人纖維肉瘤HT1080細胞、人乳腺癌MCF7細胞、人肺腺癌A549細胞的增殖抑制效果及其誘導腫瘤細胞凋亡的協同作用,以探討其抗腫瘤的協同作用機制,為臨床尋找有效的化療增效劑提供實驗依據和理論基礎。方法通過硅膠柱色譜對姜黃80%乙醇提取物進行分離純化,以理化方法及波譜學方法對分離得到的化合物進行結構鑒定;采用MTT法評價姜黃素類單體化合物對人纖維肉瘤HT1080細胞、人乳腺癌MCF7細胞、人肺腺癌A549細胞的增殖抑制作用;采用MTT法評價姜黃素單藥在HT1080細胞、MCF7細胞、A549細胞上與順鉑、阿霉素、羥基喜樹堿等藥物聯合用藥的增效作用;通過HOECHST33258染色觀察姜黃素和阿霉素聯合用藥對A549細胞凋亡的形態學變化;WESTERNBLOT法檢測對A549細胞BCL2蛋白表達的影響。結果1分離得到3個姜黃素類化合物,分別鑒定為姜黃素CURCUMINⅠ,脫甲氧基姜黃素DEMETHOXYCURCUMINⅡ,雙脫甲氧基姜黃素BISDEMETHOXYCURCUMINⅢ;2姜黃素、脫甲氧基姜黃素、雙脫甲氧基姜黃素對HT1080細胞、MCF7細胞、A549細胞的增殖均有明顯的抑制作用,姜黃素的體外增殖抑制效果最好,對三種細胞株的半數抑制濃度IC50分別為1039ΜMOLL、1185ΜMOLL、1025ΜMOLL。3在一定濃度范圍內,姜黃素和順鉑、阿霉素、羥基喜樹堿分別聯合用藥對HT1080細胞、MCF7細胞、A549細胞的增殖抑制有協同或相加作用。4姜黃素和阿霉素聯合用藥對A549細胞凋亡有協同作用,其作用可能是通過下調抑凋亡蛋白BCL2表達來實現的。結論姜黃素和順鉑、阿霉素、羥基喜樹堿分別聯合用藥對HT1080細胞、MCF7細胞、A549細胞的增殖抑制有協同或相加作用,其協同抗腫瘤的機制可能與誘導細胞凋亡,通過下調抑凋亡蛋白BCL2表達有關。體外實驗研究表明,姜黃素與化療藥聯合用藥對部分腫瘤的治療具有一定的可行性,在體外抑制人腫瘤細胞的作用中有協同增效作用,為臨床尋找有效的化療增效劑提供了一定的實驗依據和理論基礎。
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      上傳時間:2022-07-25
      頁數: 73
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    • 簡介:肥胖及以其為中心的代謝性疾病如2型糖尿病、心腦血管疾病、高膽固醇血癥等已成為危害全球公共衛生安全的重要因素。長期的化學合成藥物防治對人體的胃腸、肝臟、腎臟等器官功能具有較強毒害副作用。近年來的研究表明,藥食同源天然產物對于肥胖的早期預防和干預相對于化學合成藥物,具有安全、高效、經濟等特點,成為近年來的研究熱點。絞股藍GYNOSTEMMAPENTAPHYLLUMTHUNBMAKINO是一種傳統的藥食同源植物,作為功能性保健食品在世界范圍內已被廣泛食用。絞股藍具有降血脂、降血糖、免疫調節及保護心腦血管等多種生物活性功能,皂苷類物質被認為是其主要活性成分。本文以我國陜西省平利縣產四倍體絞股藍葉片為原料,經提取、分離得到其總皂苷成分并對其主要化學組成、結構進行解析鑒定。在此基礎上進一步對其防治由高脂飲食導致肥胖的作用及機制進行探討。全文總結如下1對四倍體絞股藍葉中總皂苷成分進行了乙醇回流提取并經大孔樹脂、硅膠及制備色譜分離。結合HRMS、NMR等技術手段分離鑒定出四倍體絞股藍總皂苷的9種主要單體化合物組成及其化學結構,其中6個化合物單體為新化。分別為23ΑH3Β20Ξ21ΒTRIHYDROXY12OXO2123EPOXYDAMMAR24ENE3OΑLRHAMNOPYRANOSYL1→2ΒDGLUCOPYRANOSYL1→3ΑLARABINOPYRANOSIDE123ΒH3Β20Ξ21ΑTRIHYDROXY12OXO2123EPOXYDAMMAR24ENE3OΑLRHAMNOPYRANOSYL1→2ΒDGLUCOPYRANOSYL1→3ΑLARABINOPYRANOSIDE223ΒH3Β20ΞDIHYDROXY12OXO2123EPOXYDAMMAR24ENE3OΑLRHAMNOPYRANOSYL1→2ΒDGLUCOPYRANOSYL1→3ΑLARABINOPYRANOSIDE323ΑH3Β20ΞDIHYDROXY12OXO2123EPOXYDAMMAR24ENE3OΑLRHAMNOPYRANOSYL1→2ΒDGLUCOPYRANOSYL1→3ΑLARABINOPYRANOSIDE423S21ΑOMETHYL3Β20ΞDIHYDROXY12OXO2123EPOXYDAMMAR24ENE3OΑLRHAMNOPYRANOSYL1→2ΒDXYLOPYRANOSYL1→3ΑLARABINOPYRANOSIDE523S21ΞOMETHYL3Β20ΞDIHYDROXY19OXO2123EPOXYDAMMAR24ENE3OΑLRHAMNOPYRANOSYL1→2ΒDXYLOPYRANOSYL1→3ΑLARABINOPYRANOSIDE6。各組分相對百分含量采用峰面積歸一化法分別為1084JGL1757JGL22410JGL342612JGL5672476JGL8和560JGL9。2考察了絞股藍總皂苷對于高脂飲食引起C57BL6小鼠肥胖的預防作用。在預防實驗中,絞股藍總皂苷能夠顯著抑制高脂飲食導致的小鼠體重增加、血清膽固醇升高及胰島素抵抗等癥狀,在100MGKGD及300MGKGD劑量下,干預組小鼠相對于高脂模型組小鼠體重分別減少了1082和2271,血清總膽固醇分別下降了87和256,HOMAIR指數分別下降了255和353。絞股藍總皂苷還降低了由高脂飲食導致的脂肪組織細胞形態肥大及IL6、MCP1等炎癥因子的表達。在機制探討上,我們報道絞股藍總皂苷預防肥胖作用可能是通過提高小鼠體內褐色脂肪功能活性及促進白色脂肪棕色化作用,即通過增加脂肪酸氧化,加速能量代謝作用來抑制高脂飲食導致的體重、膽固醇增加和胰島素抵抗。我們選取跟線粒體功能相關的基因PGC1D、CYTOC、COX4Β、褐色脂肪功能相關的基因PRDM16、CIDEA、ELOVL3、COX7D及脂肪酸Β氧化相關的基因CPT1Β、MCAD為考察對象,在MRNA及蛋白水平上研究絞股藍總皂苷對小鼠腎周、皮下白色脂肪組織及肩胛褐色脂肪組織的影響。研究發現絞股藍總皂苷能夠通過顯著提高小鼠腎周脂肪UCP1、PRDM16、PGC1D、CIDEA、ELOVL3及COX7D基因MRNA水平及腎周、皮下脂肪UCP1、PRDM16、PGC1D基因蛋白水平的表達來實現白色脂肪棕色化;通過顯著提高了肩胛褐色脂肪UCP1、PGC1Α、PRDM16、CYTOC、CPT1Β、MCAD等基因MRNA水平及UCP1、PGC1Α、PRDM16、PAMPK蛋白水平的表達來提高褐色脂肪功能。3進一步研究了絞股藍總皂苷對于肥胖小鼠的治療作用。經過8周300MGKGD劑量的絞股藍總皂苷干預,肥胖小鼠體重顯著下降了115。肥胖引起的機體炎癥、高膽固醇血癥及胰島素抵抗也得到了顯著改善,絞股藍總皂苷干預組相對于肥胖模型組,小鼠血清促炎因子IL6、TNFΑ和MCP1分別下降了54、11和13,抗炎因子IL10提高了13。血清總膽固醇下降了271,HOMAIR顯著下降了571。脂肪組織細胞形態肥大、炎癥及肝臟脂肪變性也得到顯著改善。進一步的研究表明這些作用是通過提高肥胖小鼠腎周白色脂肪棕色化、肩胛褐色脂肪功能及改善肝臟糖脂代謝等方式共同作用來實現的。4采用體外培養3T3L1前脂肪細胞模擬前脂肪細胞分化過程,探究絞股藍總皂苷及其活性皂苷單體對于前脂肪細胞分化的作用及其機制。絞股藍總皂苷具有抑制前脂肪細胞分化的作用,前脂肪細胞分化調控標志基因PPARΓ及CEBPΑ在MRNA水平及蛋白水平均受到顯著抑制。選取含量較高的4種單體皂苷同時進行試驗,發現單體JGL3的抑制作用最為明顯,將其命名為JS。JS對于前脂肪細胞分化的抑制作用具有濃度劑量關系,100ΜMJS可以抑制60的脂肪細胞甘油三酯積累。進一步的研究發現JS發揮作用時期為有絲分裂克隆期MCE。JS通過抑制細胞周期蛋白CYCLINA2及周期蛋白激酶CDK2的表達顯著抑制前脂肪細胞由G1期向S、G2M期過渡。與此同時,JS抑制了CEBPΒ同DNA啟動子結合,阻礙了前脂肪細胞調控因子PPARΓ及CEBPΑ的轉錄。這種作用后被證明是通過抑制CEBPΒ的磷酸化的結果,即JS通過抑制MAPKERK12、CYCLINA2CDK2和提高CHOP10等蛋白的表達,使CEBPΒ不能順利磷酸化進入細胞核同DNA啟動子區域結合開啟轉錄調控。WNTΒCATENIN信號通路已經被證實能夠抑制前脂肪細胞分化,JS能夠激活WNT10B同跨膜受體LRP56及FZ2結合,同時提高DVL2的表達,使得GSK3Β失去活性不能降解ΒCATENIN。持續表達的ΒCATENIN進入細胞核同DNA啟動子結合,轉錄調控抑制脂肪細胞分化因子的表達,從而完成抑制前脂肪細胞分化的目的。SIRNAΒCATENIN干擾實驗確認了絞股藍皂苷JS對于ΒCATENIN的影響。
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      上傳時間:2022-07-26
      頁數: 172
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    • 簡介:為了探討中藥抗腫瘤機制尋找抗腫瘤血管生長中藥或有效成分進行中藥對腫瘤血管生長影響的研究在運用對雞胚尿囊膜血管模型研究基礎上確定使用7日雞胚對藥物進行初步篩選使用5日雞胚對藥物進行復選通過第一步篩選我們發現了以對正常雞胚血管生長有抑制作用的藥物川芎嗪與銀杏黃酮為研究這兩種藥物對腫瘤生長和轉移的抑制作用觀察了這它們對昆明小鼠皮下移植腫瘤H22及血道轉移腫瘤H22的影響并對皮下生長的實體瘤進行了免疫組化檢測采用SABC法要測瘤細胞內血管內皮生長因子VEGF及其受體FLT1的表達結果表明川芎嗪對于小鼠實體瘤及轉移瘤有抑制作用銀杏黃酮對實體瘤的生長有抑制作用免疫組化結果顯示這兩種藥物對VEGF及其受體表達均無抑制這兩種藥物的作用機制不能用抑制血管生長因子及受體表達來解釋有待進行更深一步的研究
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      上傳時間:2022-07-27
      頁數: 48
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      上傳時間:2022-07-28
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      上傳時間:2022-07-26
      頁數: 108
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    • 簡介:目的觀察益氣活血、化痰通絡法治療冠心病心絞痛的臨床療效方法將患者隨機分為治療組與對照組其中治療組30例對照組20例治療組予以益氣通絡湯對照組給予養心氏片通過病例的對照研究觀察臨床療效結果治療組中心絞痛顯效率為60﹪總有效率933﹪心電圖顯效率167﹪總有效率767﹪中醫癥狀顯效率567﹪總有效率834﹪與對照組相比分別具有顯著性或非常顯著性差異(P<005或P<001)該文還可顯著降低甘油三脂和膽固醇含量糾正脂質代謝紊亂降低血粘度改善血液流變學結論氣虛是冠心病心絞痛的根本病機痰瘀阻絡是該病發生的中心環節益氣活血、化痰通絡是治療冠心病心絞痛的一種有效的治療方法
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      上傳時間:2022-07-26
      頁數: 37
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    • 簡介:多糖是生物化學領域中的一個重要課題并正在成為新的研究熱點到目前為止已有很多關于植物多糖特別是中草藥多糖的報道人們發現多糖具有提高免疫能力抗病毒抗菌抗氧化等多種生物學活性該論文研究了梔子多糖的分離純化及部分生物學活性并探討了通過生物技術生產梔子多糖的可行性梔子是傳統中藥其多糖在抑制腫瘤生長和抗氧化過程中起重要作用100UGML的梔子多糖在體外可以抑制S180肉瘤細胞58﹪、HCAF腹水肝癌細胞51﹪、K562人紅白血病細胞63﹪梔子多糖在活體中對HCAF肝癌實體瘤的抑制率為49﹪口服給藥的效果好于注射給藥在利用懸浮細胞生產梔子多糖的研究中通過選擇梔子多糖的高產細胞株系以及改變培養基和培養條件來增加細胞的生長和多糖的百分含量盡管梔子懸浮細胞培養有許多富于個性的特點但是有一個總的規律即利于細胞生長的條件很可能不利于梔子多糖的合成和積累梔子多糖一般在懸浮細胞培養的初期形成梔子黃色素則最早在培養的第12天開始合成因此通過培養條件的調整以及收獲時間的改變能有效地排除梔子黃色素對梔子多糖分離提取的干擾即通過改變培養條件抑制梔子黃色素的合成并在梔子黃色素產生之前收獲細胞提取梔子多糖我們采用了正交實驗設計確立了梔子多糖的提取和SAVAGE法除蛋白的條件結果發現用50倍體積的堿水在80℃下提取2小時再經過一系列醇析、脫色和脫蛋白等處理梔子果實多糖的得率為174﹪是文獻報道的3倍DEAE纖維素柱層析可以將梔子多糖分成分子量分別為14000和10000的兩種它們在結構上只是略有差異分子量為10000的梔子多糖含有糖醛酸但是它們在生物學活性上沒有太大的差別梔子多糖主要分布在果實中其次是葉莖和根中最少在懸浮細胞中梔子粗多糖的百分含量約為25﹪左右純化后為065﹪并且證實與梔子果實中的多糖有相同的生物學功能可以用于工業化生產以緩解有限的資源問題
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      上傳時間:2022-07-26
      頁數: 107
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      頁數: 65
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    • 簡介:中藥學是中華民族幾千年來防病治病經驗的結晶是具有中國特色的科學體系它的內容博大精深具有系統的理論體系、豐富的實踐經驗及顯著的臨床療效有待于我們做進一步的探討和研究充分利用各個相關學科的理論和技術來與中醫藥學交叉滲透必將會促進中藥學基礎理論研究的深入和突破該文應用微量量熱法研究了四種補益中草藥及其主要成分對大腸桿菌生長代謝的影響比較了不同的中草藥及各類成分的促菌效果并確定了促菌濃度范圍和最佳促菌濃度主要研究內容1銀杏葉、甘草、黃芪和黨參總提取物及其主要成分的提取采取溶劑浸提、萃取、柱層析等方法按中草藥各類成分的共同性質來分離藥物的各主要成分各種成分的提取方法均采取文獻中所述的方法2補益藥總提取物及其各主要成分對大腸桿菌的生長代謝影響的研究將各主要成分分別溶于DMF或水中配成溶液使之作用于細菌用2277熱活性檢測儀在相同的條件下進行補益中草藥總提取物及其各主要成分對大腸桿菌生長代謝影響過程的熱功率時間曲線的測定構建了細菌生長模型通過LOGISTIC方程計算出生長速率常數確定了生長速率常數與各成分濃度的定量關系進而確定了各成分對細菌作用的最佳濃度并對各中草藥和各主要成分的促菌效果進行了比較
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      上傳時間:2022-07-26
      頁數: 70
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    • 簡介:海洋寡糖971以下簡稱971是中國海洋大學海洋藥物與食品研究所從褐藻中提取分離并經降解得到的具有特定分子骨架的低分子海洋酸性寡糖類化合物平均分子量為1300DA目前按照國家新藥研究的規范要求已完成了所有臨床前的藥學及部分生物學研究內容臨床前藥效學研究結果顯示971對AΒ腦室注射、D半乳糖皮下注射所致老年癡果ALZHEIMERSDISEASEAD動物模型的學習記憶功能均有明顯改善作用并且具有易透過血腦屏障、毒副作用低等特點為了進一步闡明971改善AD動物學習記憶功能及其作用機制該文以AΒ作為研究靶點觀察了971對AΒ側腦室注射所致AD動物模型學習記憶功能的影響并且體外觀察了971對AΒ損傷神經細胞的保護作用在細胞和分子水平上進一步探討了971抗AΒ毒性損傷的作用機制綜上所述971可通過與AΒ結合抑制其構象轉變、纖絲形成、促進纖絲解聚進而抑制AΒ的神經細胞毒性損傷并且971還可通過抑制AΒ誘導的神經細胞內游離鈣離子濃度的升高、自由基的產生和聚集、線粒體的功能障礙調節凋亡相關蛋白的表達最終抑制AΒ引起的神經細胞凋亡所以971在體仙表現出改善AΒ所致AD動物學習記憶功能的作用因此971作為AΒ拮抗劑可望開發成抗老年癡呆新藥
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      上傳時間:2022-07-25
      頁數: 105
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      上傳時間:2022-07-26
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